Удаление антигена CD33 сделало их нечувствительными к моноклональным антителам
Американские и канадские исследователи провели пилотные клинические испытания генно-модифицированных донорских кроветворных клеток с удаленным системой CRISPR-Cas антигеном CD33 при остром миелобластном лейкозе. Эти клетки хорошо приживались и были защищены от терапии лейкоза моноклональными антителами к CD33. Отчет о работе опубликован в журнале Nature Medicine.
Пересадка донорских кроветворных стволовых клеток служит стандартом терапии пациентов с острым миелобластным лейкозом, у которых химиотерапия недостаточно эффективна. Однако при лейкозе высокого риска и миелодиспластическом синдроме даже после трансплантации часто наступает рецидив, и долгосрочная выживаемость остается низкой. Для профилактики рецидива испытывают гипометилирующие и таргетированные препараты, но их эффективность умеренна, а применение ограничивает токсичность в отношении пересаженных клеток. По некоторым показаниям при остром миелобластном лейкозе одобрен препарат гемтузумаб озогамицин. Он представляет собой конъюгированные с цитотоксическим препаратом моноклональные антитела к антигену CD33, который экспрессируется в гемопоэтических миелоидных клетках, в том числе лейкозных, но не критичен для кроветворения. Его применение после трансплантации также ограничено токсичностью для донорских клеток, экспрессирующих CD33.
Джон Диперсио (John DiPersio) из Университета Вашингтона в Сент-Луисе, его коллеги и компания Vor Biopharma провели мультицентровые открытые пилотные испытания фазы 1/2a препарата тремтелэктогена эмпогедитемцела (трем-цел, VOR33). Он представляет собой совместимые по человеческому лейкоцитарному антигену аллогенные CD34+ кроветворные стволовые клетки, у которых ген CD33 инактивирован с помощью технологии редактирования генома CRISPR–Cas9. В них приняли участие 30 взрослых пациентов с острым миелобластным лейкозом (29 человек) или миелодиспластическим синдромом (один человек) и высоким риском рецидива. После миелоабляции всем им ввели трем-цел в медианной дозе 8,01 миллиона CD34+ клеток на килограмм массы тела, медианная эффективность редактирования гена CD33 составила 90 процентов. 19 пациентов после этого получали гемтузумаб озогамицин раз в 28 дней, всего до восьми циклов (медианно четыре). 15 из них получали препарат в возрастающих дозах 0,5, 1 или 2 миллиграмма на квадратный метр поверхности тела, остальные четыре — в фиксированной дозе два миллиграмма на квадратный метр поверхности тела.
Испытания прекратили досрочно по финансовым причинам, 20 пациентов продолжали в них участвовать и 13 находились на терапии гемтузумабом озогамицином. В ходе испытаний семь участников умерли: четыре из-за прогрессирования заболевания (два получили только трем-цел, два — тремцел и гемтузумаб озогамицин), один из-за почечной недостаточности, связанной с трем-целом, аденовирусной инфекцией и противовирусным препаратом цидофовиром, один из-за синдрома печеночной синусоидальной обструкции, связанного с гемтузумабом озогамицином, и один из-за сепсиса, не связанного с лечением (последние три смерти произошли после 100 дня от трансплантации). У восьми участников развилась острая и у двух хроническая реакция «трансплантат против хозяина». Во время лечения тяжелые нежелательные явления наблюдались у 90 процентов пациентов, чаще всего это были анемия, тромбоцитопения, фебрильная нейтропения, стоматит и гипокалиемия. У 97 процентов участников были нежелательные явления, связанные с миелоабляцией, у 58 процентов — с трем-целом и у 79 процентов — с гемтузумабом озогамицином, у 87 процентов развились инфекции.
Приживление нейтрофилов было достигнуто к 28 дню от пересадки у всех пациентов, медианное время до него составило 10 дней. У 29 пациентов уровень тромбоцитов восстановился (медианное время 16 дней), у одного было подозрение на иммунную тромбоцитопению, после ее лечения и дополнительной пересадки стволовых клеток уровень тромбоцитов также восстановился. Время восстановления лимфоидных клеток соответствовало обычным показателям после трансплантации. Медианное время наблюдения за живыми пациентами составило 7,9 месяца, общая выживаемость и выживаемость без прогрессирования у всех пациентов — по 14,1 месяца. Среди получавших гемтузумаб озогамицин не наблюдалось токсичности, ограничивающей дозу. Длительной цитопении на фоне введения препарата не было. Уже после введения первой дозы наблюдалось обогащение периферической крови CD33− клетками, негативность по CD33 оставалась близкой к 100 процентам на протяжении всего лечения. У трех пациентов на фоне введения препарата развился рецидив CD33+ лейкоза.
Результаты пилотных испытаний показали, что лечение острого миелобластного лейкоза трем-целом обеспечивает высокий уровень приживления трансплантата, восстановление ростков кроветворения модифицированными клетками и их защиту от цитотоксического действия анти-CD33 моноклональных антител. Уточнить эффективность и безопасность терапии трем-целом и гемтузумабом озогамицином предстоит в более масштабных и длительных испытаниях. Также трем-цел целесообразно испытать с другими видами анти-CD33 терапии, которые находятся в разработке, к примеру с анти-CD33 CAR-T-лимфоцитами.
Модификация кроветворных стволовых клеток с помощью системы CRISPR-Cas9 уже нашла клиническое применение — препарат эксагамглоген аутотемцел на ее основе используют для лечения тяжелых форм серповидноклеточной анемии и бета-талассемии. Результаты долгосрочного наблюдения за участниками его клинических испытаний показали, что такая терапия существенно повышает связанное со здоровьем качество жизни.